規格參數:
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
大腸埃希氏菌說明書 | Escherichi | EY-J963240 |
資源名稱: 大腸埃希氏菌
種屬: Escherichia coli
提供形式: 定量菌片,西林瓶,2.0~3.0×10e3CFU/瓶
安全等級: 1
模式菌株: no
應用領域: 研究;分析檢測。研究、質量控制用菌,《GB 4789.2-2010菌落總數測定》、《GB 4789.3-2010腸菌群計數》、研究;分析檢測。《GB/T 4789.32-2002大腸菌群的快速檢驗》、《GB 4789.39-2013糞大腸菌群計數》陽性對照菌株,2015版中國藥典質控菌株。
培養基: 營養肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。
生長條件: 37℃,好氧
生長特性: G-桿菌,賴氨酸脫羧酶、脫羧酶陽性,雙水解酶陰性,尿素酶、苯脫氨酶陰性,IMViC實驗:+、+、-、-;MUG陽性,纖維二糖、側金盞花醇陰性,葡萄糖銨陽性;不產H2S,發酵乳糖產酸產氣。兼性厭氧,適pH7.4~7.6。
存儲條件: -20℃,避光冷藏
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低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
Fusobacrium nucleatum subsp nucleatum 中文名稱:具核梭桿菌聚核亞種Fusobacrium nucleatum subsp nucleatum提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:哥倫比亞血平板(成品)生長條件:37℃,厭氧,24-48h 純度:≥99%
Bacillus pasurii 中文名稱:巴氏芽孢桿菌Bacillus pasurii提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:CASO +20g/L尿素:蛋白胨 5.0 g,牛肉浸膏 3.0 g , 尿素 20.0 g ,蒸餾 1.0 L,pH 7.3 。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧 純度:98%
Clostridium difficile 中文名稱:艱難梭菌Clostridium difficile提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質量控制培養方法培養基:硫乙醇鹽培養基::酪胨15.0g,酵母浸出5.0g,葡萄糖5.0g,硫乙醇鈉0.5g,L-胱氨0.5g,刃天青0.001g,2.5g,pH7.1±0.2。121℃,15min。生長條件:36℃,厭氧存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98%
Escherichia coli EHEC O157:H7 中文名稱:出血性大腸埃希氏菌 O157:H7Escherichia coli EHEC O157:H7提供形式:凍干管、試管斜面安全等級:2模式菌株:no應用領域:研究、質量控制培養方法培養基:營養瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 20.0g,蒸餾 1.0L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。生長條件:37℃,好氧生長特性G-桿菌,賴氨脫羧酶、鳥氨脫羧酶均陽性,精氨雙解酶陰性,有動力,IMViC實驗:+、+、-、-,尿素酶、丙氨脫氨酶陰性,不產H2S,不發酵、纖維二糖和側金盞花醇,MUG陰性,發酵乳糖、。兼性厭氧,適pH7.4~7.6。血清型:O 157 : H 7。存儲條件:4℃,避光冷藏 純度:95%
Haemophilus influenzae 中文名稱:流感嗜血桿菌Haemophilus influenzae分離基物:57歲患者的肺膿瘍提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no應用領域:質控菌株;藥敏的試驗;呼吸的研究培養方法培養基:巧克力平板(成品)生長條件:37℃,5%CO2 純度:天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in
Kocuria│rhizophila 中文名稱:嗜根考克氏菌Kocuria│rhizophila提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:抗生物質殘留檢查。培養方法培養基:CM0002生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:天然礦物,晶粒,大約 0.06-19in
Escherichia coli O157:H7 中文名稱:大腸埃希氏菌O157Escherichia coli O157:H7提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應用領域:研究;。BBL科瑪嘉質控菌株。GB4789.28-2013《食品微生物學檢驗 培養基:和試劑的質量要求》中規定質控菌株。培養方法培養基:營養肉汁瓊脂:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。生長條件:37℃,好氧,24h生長特性血清型O157:H7,陰性,Vero 細胸素(志賀素)陰性。存儲條件:2-8℃ 純度:AR,98%
Vibrio harveyi 中文名稱:哈維氏弧菌Vibrio harveyi分離基物:哈維氏弧菌菌株BB120提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no應用領域:哈維氏弧菌 BB-170培養方法培養基:Marine Agar 2216 :蛋白棟 5.00 g ,酵母 1.00 g ,Fe(III) citra 0.10 g ,NaCl 19.45 g, 無MgCl2 5.90 g ,Na2SO4 3.24 g, CaCl2 1.80 g ,KCl 0.55 g, NaHCO3 0.16 g, KBr 0.08 g ,SrCl2 34.00 mg ,H3BO3 22.00 mg, Na-silica 4.00 mg ,NaF 2.40 mg, (NH4)NO3 1.60 mg ,Na2HPO4 8.00 mg, 蒸餾 1000.00 ml, pH 7.6 ± 0.2生長條件:30℃,好氧 純度:99%
大腸埃希氏菌說明書酚紅煌綠瓊脂豬晶狀體上皮細胞肝竇內皮細胞phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 磷化腺苷單磷活化蛋白激酶α1抗原
水瓊脂培養基內皮細胞培養基肝星形細胞CREB-1 (cAMP responsive element binding protein-1) 環腺苷應答元件結合蛋白(抗原)
半固體營養瓊脂平滑肌細胞培養基腎實質細胞phospho-CREB-1 磷化環腺苷應答元件結合蛋白(多肽)
RVS肉湯周邊細胞培養基腎系膜細胞ADRA2 peptide 腎上腺素能受體2抗原
MKTTn肉湯基礎腦膜細胞培養基膀胱上皮細胞CRF (Corticotropin-Releasing Factor) 促腎上腺皮質激素釋放因子
M肉湯神經前體細胞培養基膀胱平滑肌細胞CT (Calcitonin ) 降鈣素(抗原)
煌綠肉湯增菌液基礎神經前體細胞分化培養基腎動脈內皮細胞CT-R (Calcitonin receptor) 降鈣素受體(抗原)
Rustigian氏尿素培養基基礎少突膠質細胞培養基腎動脈平滑肌細胞Ferritin peptide 鐵蛋白抗原
綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。