產品及特點：
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程，使每個循環變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品(pin)名稱 | 規格 | 貨號 |
鵪鶉源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9514 |
運輸及保存： 低溫運輸，-20℃保存，保存期限為12個月。
自備試劑：樣品 RNA。
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設計并合成引物，完成熒光定量PCR實驗以及后續數據分析，提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對，定量表達分析，定性分析，SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記(ji) 6 個離心管，分別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋(shi)液，用帶芯槍頭，下(xia)同）。
3. 在 7 號管中(zhong)加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性(xing)對照(試劑盒提供)，充分(fen)震蕩1分(fen)鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放(fang)冰上待(dai)用(yong)。
4. 換槍頭，在 6 號(hao)管中加(jia)入 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝(bei)/μL 的陽性對(dui)照(zhao)(上(shang)步稀釋所得)，充分震(zhen)蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的標(biao)準曲(qu)線樣品(pin)。放冰上(shang)待用。
5. 換(huan)槍頭，在 5 號管中(zhong)加(jia)入 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)陽性對照(上(shang)步(bu)稀(xi)釋所得(de))，充分震蕩(dang)1分鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝(bei)/μL 的(de)標準曲線(xian)樣品。放冰上(shang)待用(yong)。
6. 重復上面的(de)操作直到(dao)得(de)到(dao) 6 個稀(xi)釋度(du)的(de)標(biao)準(zhun)曲線樣品。放冰上待(dai)用(yong)。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品(pin)，設置N+2個提取，多出的(de)一(yi)個是(shi)PC（樣品(pin)制(zhi)備陽(yang)性對(dui)照(zhao)(zhao)），一(yi)個是(shi) NC（樣品(pin)制(zhi)備陰性對(dui)照(zhao)(zhao)）。可以(yi)用(yong)(yong)10μL陽(yang)性對(dui)照(zhao)(zhao)的(de)10000倍稀(xi)釋(shi)液再加上一(yi)定量的(de)水使(shi)總體(ti)(ti)積跟每(mei)次制(zhi)備要求的(de)體(ti)(ti)積一(yi)樣，以(yi)此作為PC。另(ling)外用(yong)(yong)水作為NC。
8. 用自(zi)選方法純化樣品的(de)RNA，本(ben)試劑盒跟(gen)市場上大多數病毒RNA提取(qu)試劑盒兼容。也以選購本(ben)公(gong)司的(de)柱式(shi)病毒RNAout。本(ben)試劑盒免費贈送20次免RNA提取(qu)的(de)核(he)酸釋放劑試用裝，該釋放劑的(de)裂解液可(ke)以直接作為RT-PCR模(mo)板，省略(lve)了RNA提取(qu)步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做(zuo)(zuo)定(ding)量分析(xi)并(bing)且(qie)只(zhi)做(zuo)(zuo)1次重復，則標(biao)記N+9個PCR 管(guan)，其中N+2個用(yong)(yong)(yong)于(yu)上步(bu)得到(dao)的 N+2個樣品，1個用(yong)(yong)(yong)于(yu)PCR陰(yin)性(xing)對照(zhao)（用(yong)(yong)(yong)水做(zuo)(zuo)模(mo)板(ban)），6個用(yong)(yong)(yong)于(yu)標(biao)準曲(qu)線。如果做(zuo)(zuo)定(ding)性(xing)分析(xi)，并(bing)且(qie)只(zhi)做(zuo)(zuo)1次重復，則標(biao)記N+4 個PCR管(guan)，其中N+2個用(yong)(yong)(yong)于(yu)上步(bu)得到(dao)的N+2個樣品，1 個用(yong)(yong)(yong)于(yu) PCR 陰(yin)性(xing)對照(zhao)（用(yong)(yong)(yong)水做(zuo)(zuo)模(mo)板(ban)），1個用(yong)(yong)(yong)于(yu)PCR陽(yang)性(xing)對照(zhao)（用(yong)(yong)(yong)第4號管(guan)的陽(yang)性(xing)對照(zhao)稀釋(shi)液(ye)做(zuo)(zuo)模(mo)板(ban)）。下面只(zhi)以(yi)定(ding)量分析(xi)為例描(miao)述操(cao)作步(bu)驟。
10. 在標記管(guan)中按下表加(jia)入(ru)各成分（本表只列出一次重復。樣品管(guan)和陰性(xing)對照(zhao)設(she)置(zhi)完畢后才設(she)置(zhi)陽性(xing)對照(zhao)，并且(qie)陽性(xing)對照(zhao)樣品要等所有管(guan)子蓋上蓋子儲存(cun)好(hao)后加(jia)）
Ⅲ型纖連蛋白連接段(1-25)蛋白酶K 用于分子生物學，≥30 units/mg proteinHuman WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit
異硫酸熒光素-LC-髓磷脂基礎蛋白肽底物玫瑰紅酸 ARHuman WRAP53 ELISA Kit
FluM1 A2 (58-66)二甲(jia)苯青FF 分(fen)子生物(wu)學級Human WDR81 ELISA Kit
Fmoc-Lys(Boc)-Leu-Lys(Boc)5-溴-4氯-3吲哚基β-D 半(ban)乳糖 99%Human WRN ELISA Kit
Fmoc-因子a紅色氧化鉛 98%Human WRNIP1 ELISA Kit
纖維結合素酰，軟體動物心臟興奮肽2-羥基-3-萘甲酸 97%Human WDR92 ELISA Kit
纖維結合素樣神經肽；分裂FLRF酰L-蘋果酸 98%Human WIT1 ELISA Kit
纖維結合素相關肽，椎實螺七肽L-蘋果酸 CPHuman WNK4 ELISA Kit
纖維結合素相關肽，Pyr -DPFLRFM - NH2鉻酸銫 AR，99.5%Human WNT3(Proto-oncogene Wnt-3) ELISA Kit
纖維結合素相關肽，SDPFLRF - NH2四酸鋰 99%Human WRAP53 ELISA Kit
Forkhead導出肽，Woodtide四酸鋰 99.9%Human WRN ELISA Kit
甲酰基黃體生成素釋放激素(2-10)四酸鋰 99.99%Human WDR81 ELISA Kit
G-A-Y溴化鋰 99.9% metals basisHuman WSB1 ELISA Kit
G-F-R甲鈷 98%Human WDR92 ELISA Kit
G-P-R去(qu)氧(yang)膽(dan)酸 98%Human WRNIP1 ELISA Kit
鵪鶉源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒Midline 2蛋(dan)白(MID2)(酶聯(lian)免疫吸(xi)附(fu)試驗法(fa))Celite硅藻土，酸洗(用于(yu)總膳食(shi)纖(xian)維(wei)含量分析,TDF-100A) 質量規格：>98.0%(GC)
多聚蛋白2(MMRN2)(酶聯免疫吸附試驗法)Celite硅藻土，酸洗(用于總膳食纖維含量分析,TDF-100A) 質量規格：>98.0%(GC)
Metaxin 2蛋白(MTX2)(酶聯免疫吸附(fu)試驗法)Celite® 硅藻土(tu)545(助濾(lv)劑(ji),通量煅(duan)燒(shao)（filter aid,flux calcined）) 質(zhi)量規格：>98.0%(GC)
黑素皮質激素4受體(MC4R)(酶聯免疫吸附試驗法)Celite® 硅藻土545(助濾劑,通量煅燒（filter aid,flux calcined）) 質量規格：>98.0%(GC)
黑素皮質激素5受體(MC5R)(酶聯免疫吸附試驗法)氯己定(標準品) 質量規格：>98.0%(GC)(T)
神經元導向因子3(NAV3)(酶聯免疫吸附試驗法)氯己定(標準品) 質量規格：>98.0%(GC)
神經元導向因子2(NAV2)(酶聯免疫吸附試驗法)香茅(分析標準品,≥99.0%(GC)) 質量規格：>96.0%(GC)
溶血磷脂酶Ⅲ(LYPLA3)(酶聯免疫吸附試驗法)香茅(分析標準品,≥99.0%(GC)) 質量規格：>97.0%(GC)
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