綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
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規格參數:
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
46 [1, IFO 13718]規格 | Acinetobac | EY-J963270 |
資源名稱: 46 [1, IFO 13718]
種屬: Acinetobacter calcoaceticus (Beijerinck) Baumann et al.
提供形式: freeze-dried
安全等級: 2
模式菌株: yes
應用領域: Produces isoprene
培養基: Medium 3: Nutrient agar or nutrient broth
生長條件: Temperature: 30°C<br>Atmosphere: Aerobic
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
Tatumellaptyseos 中文名稱:痰塔特姆氏菌Tatumellaptyseos分離基物:喉嚨,美國安全等級:1模式菌株:no培養方法生長條件:37℃ 純度:95%
Staphylococcuscohniisubsp.cohnii 中文名稱:科氏葡萄球菌科氏亞種Staphylococcuscohniisubsp.cohnii分離基物:人體皮膚安全等級:1模式菌株:yes培養方法生長條件:37℃ 純度:98%
Bacroide suniformis 中文名稱:單形擬桿菌Bacroide suniformis分離基物:人類糞便安全等級:1模式菌株:no培養方法生長條件:37℃ 純度:99%
Corynebacriumpseudotuberculosis 中文名稱:假結合棒桿菌Corynebacriumpseudotuberculosis分離基物:羊的感染腺安全等級:1模式菌株:yes培養方法生長條件:37℃ 純度:99%
Corynebacriumulcerans 中文名稱:潰瘍棒狀桿菌Corynebacriumulcerans分離基物:人的喉嚨,英國安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:113生長條件:37℃ 純度:97%
Corynebacriumpropinquum 中文名稱:接近棒桿菌Corynebacriumpropinquum分離基物:人的呼吸道安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:113生長條件:37℃ 純度:Pt 24.2%
Arcanobacriumhaemolyticum 中文名稱:溶血隱秘桿菌Arcanobacriumhaemolyticum分離基物:臨床分離,芝加哥大學,1988年安全等級:1模式菌株:no應用領域:質量控制菌株。培養方法培養基:35生長條件:37℃,5%CO2 純度:Pt 24.2%
Enrococcuscasseliflavus 中文名稱:鉛黃腸球菌Enrococcuscasseliflavus安全等級:1模式菌株:no應用領域:質量控制菌株培養方法培養基:35生長條件:37℃ 純度:99%
46 [1, IFO 13718]規格Bromocresol-purple azide broth 溴甲酚紅紫疊氮肉湯人淋巴內皮細胞裂解物DL-阿拉伯糖Caspase-12(hunman) 半胱胺蛋白酶蛋白-12抗原(人)
Brucella agar 布魯氏菌瓊脂人淋巴成纖維細胞裂解物N-Acetyl-Val-Ala-Asp-alTmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2) 膠質細胞系源性神經營養因子(多肽)
Calcium caseinate agar acc.to FRAZIER and RUPP,modified人口腔角質細胞裂解物4,4′-(六氟異亞基)二酚TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha) 人腫瘤壞死因子-α(多肽抗原)
酪蛋白鈣瓊脂人牙齦成纖維細胞裂解物4,4′-(六氟異亞基)二酚rh-TNF-Alpha(rh-Tumor Necrosis Factor alpha) 重組人腫瘤壞死因子
Campylobacter selective agar(base) 彎曲菌選擇培養基人牙周膜成纖維細胞裂解物4,4′-(六氟異亞基)二酚rh-TNF alpha protein GST Tagged 重組人腫瘤壞死因子
Campylobacter selective supplement 彎曲菌選擇培養添加劑人食道上皮細胞裂解物4,4′-(六氟異亞基)二酚TRA16 激素受體相關蛋白
人食道平滑肌細胞裂解物(環基)三苯基溴化膦rh-IL-1Ra(Recombinant Human Interleukin-1 receptor antagonist His Tag) -1受體拮抗劑
Candida selective agar acc.to NICKERSON 念珠菌選擇瓊脂人腸微血管內皮細胞裂解物2-甲基-4-溴苯甲rhBMP-2/BMP2 重組人骨形態發生蛋白-2